Transformasi Plasmid pTRLI ke dalam Protoplas Aspergillus terreus dengan Penambahan Polietilenglikol

Penulis

  • DUDI HARDIANTO BADAN PENGKAJIAN dan PENERAPAN TEKNOLOGI ,
  • MARLIA SINGGIH INSTITUTE OF TECHNOLOGY BANDUNG ,
  • AMIR MUSADAD INSTITUTE OF TECHNOLOGY BANDUNG ,
  • WAHONO SUMARYONO BADAN PENGKAJIAN dan PENERAPAN TEKNOLOGI ,
  • TUTUS GUSDINAR BADAN PENGKAJIAN dan PENERAPAN TEKNOLOGI ,

Kata Kunci:

transformasi plasmid, plasmid pTRLI, protoplas, Aspergillus terreus

Abstrak

Transformasi plasmid merupakan proses masuknya plasmid ke dalam protoplas atau sel inang yang mengakibatkan perubahan materi genetika. Tujuan dari penelitian untuk mentransformasi plasmid pTRLI ke dalam protoplas Aspergillus terreus dan menentukan stabilitas transforman. Penelitian diawali dengan isolasi plasmid pTRLI, penentuan kemurnian dan konsentrasi plasmid pTRLI dengan menggunakan serapan pada panjang gelombang 260 dan 280 nm dari alat nanodrop. Kemudian, protoplas A. terreus diisolasi secara enzimatik dengan enzim kitinase, selulase, dan maserosim. pTRLI ditransformasi ke dalam protoplas A. terreus dengan penambahan kalsium klorida dan polietilenglikol. Transforman ditumbuhkan dalam media Czapek Dox agar yang mengandung piritiamin 1 mg/L. Jumlah transforman yang dapat tumbuh antara 12 sampai 19 transforman/µg plasmid pTRLI. Transforman dideteksi dengan mengamplilikasi gen ptrA yang berukuran 801 pb. Dari penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa PEG dapat digunakan untuk mentransformasi plasmid pTRLI ke dalam protoplas A. terreus dan transforman stabil sampai generasi ke S.

Referensi

Unduhan

Diterbitkan

2012-04-30

Terbitan

Bagian

Articles